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第1篇

[關(guān)鍵詞] 柴胡注射液；生物活性測定法；PGE2；下丘腦神經(jīng)細(xì)胞

[收稿日期] 2013-05-13

[通信作者] 王志斌，主任藥師，E-mail：

中藥注射液是一個(gè)多成分綜合作用的體系，少數(shù)指標(biāo)性成分不能完全反映其整體質(zhì)量，更不能完全保證其臨床療效。2010年版《中國藥典》新增的中藥生物活性檢定研究指導(dǎo)原則[1]，旨在以中藥的生物效應(yīng)作為評判中藥質(zhì)量的標(biāo)尺，使中藥質(zhì)量與其臨床效應(yīng)接軌。本實(shí)驗(yàn)以期在對柴胡注射液解熱作用機(jī)制研究的基礎(chǔ)上[2-3]，建立與整體作用途徑一致的離體模型，并探討柴胡注射液在體外對PGE2干擾作用的相關(guān)性，探索柴胡注射液體外抑制升溫遞質(zhì)PGE2釋放生物活性檢定法的建立。

1 材料

1.1 動物 SD孕鼠，SPF級，孕期16～18 d。合格證號SCXK（京）2006-0009，購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司。

1.2 試劑 柴胡注射液（昆明興中制藥有限公司，批號20100405）。種植培養(yǎng)基：78%高糖DMEM培養(yǎng)基（GIBCO產(chǎn)品，貨號12800-058）+10%胎牛血清（天津市灝洋生物制品科技有限公司，批號20091023）+10%馬血清（Hyclone，貨號SH30074.02 ）+1%青鏈霉素（GIBCO，貨號15140-122）+1%L-谷氨酰胺（培養(yǎng)基放置2周后加）（Amresco，貨號0374）；維持培養(yǎng)基：96%NeurobasalTM Medium（Gibico，貨號211203-049）+2%B-27 Supplement（Gibico，貨號17504-044）+1%青鏈霉素+1%L-谷氨酰胺；D-Hanks平衡鹽（按比例配制后115 ℃高壓滅菌15 min：KCl 0.2 g，KH2PO4 0.03 g，NaCl 4.0 g，NaHCO3 0.175 g，NaHPO4?12H2O 0.066 g溶于500 mL去離子水中，pH 7.0～7.2）；rrIL-1β（美國R&D，貨號501-RL）；PGE2含量ELISA試劑盒（RB，貨號CK-E30446R）；MTT（Amresco，貨號E859）；L-多聚賴氨酸（Sigma，貨號P-1399）；胰酶（Amresco，貨號0458）；DMSO（Amresco，貨號0231）。

1.3 儀器 PB602-N電子天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]；ClassTypeB2型生物安全柜；NAPCO6500型二氧化碳培養(yǎng)箱；倒置顯微鏡（Olympus）；SpectraMax190型酶標(biāo)儀；HZS-HA型水浴振蕩器；XT2-30型解剖鏡（北京泰克儀器有限公司）。

2 方法

2.1 SD胎鼠下丘腦神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)[4-5] 取18～20 d SD孕鼠，腹腔注射4%水合氯醛麻醉（1 mL?kg-1），75%乙醇消毒后無菌環(huán)境中取出胎鼠，浸入預(yù)冷D-Hanks中取出胎鼠大腦。解剖鏡下仔細(xì)剔除胎鼠大腦的軟腦膜和血管，并以視神經(jīng)和灰結(jié)節(jié)交叉點(diǎn)定位，分離出雙側(cè)下丘腦，將其轉(zhuǎn)入冰冷的D-Hanks中。將處理后的雙側(cè)下丘腦剪成約1 mm3的碎組織塊，將剪碎的組織塊轉(zhuǎn)入具塞離心管中置冰浴環(huán)境，放置沉淀后吸棄上清，再加入冰冷的D-Hanks洗3次。加入適量37 ℃預(yù)溫的0.125%胰酶，37 ℃消化15 min，消化期間每間隔5 min輕輕震蕩1次。消化完畢后放置沉淀，吸棄胰酶，加預(yù)溫種植培養(yǎng)基終止消化2～3次。再加入適量種植培養(yǎng)基中用拋光后的玻璃吸管輕柔吹打消化后組織碎塊10～20次。吹打后過200目篩，吸少量細(xì)胞液用0.4%臺盼藍(lán)計(jì)數(shù)，保證細(xì)胞存活率在95%以上。加種植培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞密度為1×105～3×105個(gè)/mL，接種到0.025 g?L-1多聚-L-賴氨酸預(yù)處理過的細(xì)胞培養(yǎng)板中，置CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（37 ℃，5%CO2） 4～6 h。待細(xì)胞貼壁后，換維持培養(yǎng)基（96%Neurobasal+2%B27+1%青鏈霉素+1%L-谷氨酰胺）繼續(xù)培養(yǎng)，此后每3～5 d半量換液1次。

2.2 PGE2含量經(jīng)時(shí)變化監(jiān)測 下丘腦神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)7 d后，換液過程中，加入終濃度為40 μg?L-1的rrIL-1β刺激，并分別在刺激后的1，2，4，8，10，12，24 h收集細(xì)胞液，3 000 r?min-1離心10 min，收集上清放置于-20 ℃?zhèn)錅yPGE2含量。每一收集時(shí)間點(diǎn)同時(shí)設(shè)6個(gè)復(fù)孔，并設(shè)不加rrIL-1β刺激的空白對照孔。按ELISA試劑盒說明測細(xì)胞液中PGE2含量。比較經(jīng)rrIL-1β刺激后不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞釋放PGE2的含量變化。

2.3 柴胡注射液對rrIL-1β刺激下丘腦神經(jīng)細(xì)胞釋放PGE2含量變化的影響 按上述方法培養(yǎng)下丘腦神經(jīng)細(xì)胞7 d，加入終濃度為40 μg?L-1的rrIL-1β刺激，40 min后，按組間系數(shù)0.8加入終濃度分別為10.00，8.00，6.40，5.12，4.10，3.28，2.62，2.10 mL?L-1的柴胡注射液并開始計(jì)時(shí)。10 h時(shí)收集細(xì)胞外液，3 000 r?min-1離心10 min，取上清備測PGE2含量（未及時(shí)測量則將上清液置于-20 ℃保存待測）。平行設(shè)置不加藥對照組和空白組，每組設(shè)6個(gè)復(fù)孔。按ELISA試劑盒說明測細(xì)胞液中PGE2含量。計(jì)算不同濃度柴胡注射液對PGE2釋放的抑制率（抑制率=模型組PGE2含量-給藥組PGE2含量/模型組PGE2含量×100%）。并分析柴胡注射液加樣濃度與對應(yīng)細(xì)胞液中PGE2含量變化是否線性相關(guān)。

2.4 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以±s表示，多組樣本間差異用單因素方差分析（One-way ANOVA）方法檢驗(yàn)，兩兩比較用LSD法。相關(guān)性分析采用一元線性回歸分析。P

3 結(jié)果

3.1 rrIL-1β刺激下丘腦神經(jīng)細(xì)胞釋放PGE2經(jīng)時(shí)變化 rrIL-1β刺激下丘腦神經(jīng)細(xì)胞1，2 h后，未測到細(xì)胞液中PGE2含量有明顯上升，細(xì)胞釋放PGE2與空白組無顯著性差異；隨rrIL-1β刺激時(shí)間的延長，rrIL-1β刺激后4～12 h，細(xì)胞外液中的PGE2含量較空白組顯著升高（4，8，10 h：P

與空白組相比1）P

圖1 rrIL-1β刺激下丘腦神經(jīng)細(xì)胞釋放PGE2經(jīng)時(shí)變化

Fig.1 The rrIL-1β stimulation of hypothalamic neurons release PGE2 variation with time

3.2 柴胡注射液體外干預(yù)PGE2釋放量效關(guān)系考察 rrIL-1β刺激下丘腦神經(jīng)細(xì)胞10 h后，對照組細(xì)胞液中PGE2含量與空白組有顯著性差異（P

3.3 柴胡注射液與IL-1β刺激下丘腦神經(jīng)細(xì)胞液中PGE2含量變化的相關(guān)性分析 將柴胡注射液加樣濃度與對應(yīng)的加樣后細(xì)胞液中PGE2含量變化做相關(guān)性分析，可知柴胡注射液給藥濃度與給藥后細(xì)胞液中PGE2含量變化相關(guān)性良好?；貧w方程Y=-0.583X+16.638，提示柴胡注射液給藥濃度與IL-1β刺激下細(xì)胞液中PGE2含量呈正相關(guān)（r=0.949，P

4 討論

目前研究認(rèn)為，體溫調(diào)節(jié)中樞在下丘腦，在外源

表1 柴胡注射液對PGE2的抑制生成作用

Table 1 Effect of bupleurum injection inhibitory rate of PGE2

表2 柴胡注射液給藥濃度與PGE2含量變化相關(guān)性分析

Table 2 Bupleurum injection analysis for the variation of concentration and PGE2 content

性和內(nèi)生致熱原條件下產(chǎn)生的單向或多相熱的過程中，PGE2是發(fā)熱介質(zhì)學(xué)說中最重要的中樞介質(zhì)[6]。本實(shí)驗(yàn)通過柴胡注射液抑制體外下丘腦神經(jīng)細(xì)胞釋放PGE2，進(jìn)一步證實(shí)了柴胡注射液的解熱作用可能與其抑制發(fā)熱中樞PGE2釋放有關(guān)。研究表明下丘腦可通過自分泌和旁分泌的方式釋放PGE2。并有體外實(shí)驗(yàn)表明，用IL-1β可誘導(dǎo)離體培養(yǎng)的下丘腦組織釋放PGE2和cAMP增多[7-8]。本實(shí)驗(yàn)選用rrIL-1β刺激下丘腦神經(jīng)細(xì)胞釋放PGE2離體模型，并用柴胡注射液干預(yù)該模型PGE2釋放。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示柴胡注射液干預(yù)下，離體模型PGE2含量降低，且干預(yù)作用與劑量間有較好的線性相關(guān)。

根據(jù)中藥生物活性檢定研究指導(dǎo)原則，生物活性檢定發(fā)的建立應(yīng)考慮建立專屬性強(qiáng)，操作簡單，檢測迅速、準(zhǔn)確的模型，且優(yōu)先選擇離體模型。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知：rrIL-1β可刺激離體下丘腦神經(jīng)細(xì)胞釋放PGE2，釋放的趨勢是PGE2含量先上升，至10 h達(dá)到峰值，而后下降至正常水平。根據(jù)這一趨勢，可探索性建立離體模型，確定解熱藥物在體外作用機(jī)制實(shí)驗(yàn)中升溫介質(zhì)PGE2的測定時(shí)間，為發(fā)熱和藥物解熱機(jī)制的研究提供參考依據(jù)。進(jìn)一步對柴胡注射液體外抑制PGE2釋放進(jìn)行量效關(guān)系考察，結(jié)果顯示柴胡注射液對IL-1β刺激下丘腦神經(jīng)細(xì)胞液釋放PGE2有很好的抑制作用，且相關(guān)性顯著。線性相關(guān)結(jié)果提示濃度與對應(yīng)的抑制率之間線性較好（r=0.911）。初步對在前期實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上建立柴胡注射液生物活性檢測法進(jìn)行了探索性的研究：根據(jù)整體動物實(shí)驗(yàn)確定的檢測指標(biāo)，以及根據(jù)體外實(shí)驗(yàn)建立的離體發(fā)熱模型，并且結(jié)合柴胡注射液體外抑制PGE2釋放的考察，使建立柴胡注射液離體發(fā)熱模型的生物活性檢測法，使其質(zhì)量與臨床效應(yīng)關(guān)聯(lián)成為可能。本實(shí)驗(yàn)的試驗(yàn)思路和結(jié)果為柴胡注射液生物活性檢測法的建立奠定了基礎(chǔ)，為完善柴胡注射液質(zhì)量控制方法提供了一條新的思路。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 中國藥典.一部[S].2010：附錄ⅩⅧC.

[2] 左澤平，王志斌，高陽，等.柴胡注射液對LPS大鼠解熱機(jī)制的研究[J].中藥藥理與臨床，2012，28（4）：57.

[3] 高陽，王志斌，左澤平，等.柴胡注射液對LPS發(fā)熱模型大鼠解熱藥效的研究[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，35（10）：696.

[4] 王旭輝，張岫竹，王伍超，等.大鼠下丘腦神經(jīng)元培養(yǎng)的新方法[J].第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，31（17）：1709.

[5] 王蘭，鄭慧媛，宋天保，等.體外下丘腦神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)探討[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志，2005，34（5）：538.

[6] 黃啟福.病理學(xué)[M].北京科技出版社，2007：127.

[7] 王達(dá)安，胡巢鳳，楊皓莊，等.α-促黑素細(xì)胞激素對IL-1β刺激離體兔下丘腦釋放PGE2的抑制作用[J].暨南大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，1998，19（2）：5.

[8] 王達(dá)安，胡巢鳳，楊皓莊，等.α-促黑素細(xì)胞激素對IL-1β刺激離體兔下丘腦釋放cAMP的抑制作用[J].中國病理生理雜志，1997，3（4）：360.

Bioactivity assay of Bupleurum injection for inhibiting

PGE2 release in vitro

ZUO Ze-ping1， WANG Zhi-bin1*， GAO Yang1， GUO Yu-dong1， WANG Bi-song1， SU Bin2， SONG Cheng-cheng2

（1.Beijing Institute for Drug Control， Beijing 100035， China；

2.Beijing University of Traditional Chinese Medicine， Beijing 100102， China）

[Abstract] Objective： To establish the in vitro model of PGE2 released by hypothalamic neurocytes under rrIL-1β in vitro interference， and investigate the correlation of the PGE2 content and the effect of the drug effect concentration in the model under the effect of Bupleurum injection.Method： Hypothalamic neurocytes were cultured in vitro， and added with rrIL-1β（40 μg?L-1） stimulation.Cell sap was collected at different time points.ELISA was adopted to determine the content of PGE2 in cell sap collected at different time points.Hypothalamic neurocytes were cultured in vitro， added with rrIL-1β（40 μg?L-1） stimulation and then different concentrations of Bupleurum injection.The changes in the content of PGE2 in cell supernatant were detected by ELISA.An analysis was made on the linear relationship between the sample concentration and the inhibition rate of PGE2.Result： The rrIL-1 cells could stimulate in vitro cultured hypothalamic neurocytes to release PGE2 and reach the peak at 10 h.Bupleurum injection could significantly interfere the release of PGE2 in the in vitro model （P

第2篇

關(guān)鍵詞：物質(zhì)鑒定；改進(jìn)建議

中圖分類號：G427 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1992-7711（2014）02-088-1

“鑒定生物組織中的糖類、脂肪、蛋白質(zhì)”是高中生物蘇教版《分子與細(xì)胞》中一個(gè)重要的學(xué)生實(shí)驗(yàn)，也是學(xué)生進(jìn)入高中接觸的第一個(gè)生物實(shí)驗(yàn)。高一新生的思維方式正以形象思維為主向抽象思維為主過渡，通過教師對實(shí)驗(yàn)原理的講解，他們迫切希望通過自己的實(shí)際操作進(jìn)一步認(rèn)識生命的本質(zhì)。精心組織該實(shí)驗(yàn)，會較好地培養(yǎng)學(xué)生的基本實(shí)驗(yàn)技能，如徒手切片技術(shù)、制作臨時(shí)裝片、顯微鏡操作、水浴加熱等，激發(fā)學(xué)習(xí)生物的興趣。該實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與學(xué)生的實(shí)際生活密切聯(lián)系，整體操作難度較小。為了增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)效果，同時(shí)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的探究性和實(shí)用性，結(jié)合本人的教學(xué)實(shí)際經(jīng)驗(yàn)，現(xiàn)對實(shí)驗(yàn)材料及實(shí)驗(yàn)步驟提出如下建議：

一、還原性糖的鑒定

雪梨、蘋果、白蘿卜、白蘿卜組織液都可以作為實(shí)驗(yàn)材料，但是也各有特點(diǎn)和區(qū)別。蘋果組織液必須新制，否則因?yàn)樘O果多酚氧化酶的作用，使之很快氧化呈褐色，影響后面實(shí)驗(yàn)顏色的觀察，尤其是根據(jù)實(shí)驗(yàn)正常進(jìn)度，本實(shí)驗(yàn)一般在氣溫較高的初秋進(jìn)行，氧化酶的作用速度更快，組織液很易被氧化成褐色，將反應(yīng)產(chǎn)生的顏色掩蓋，這樣給實(shí)驗(yàn)材料的制備增加了麻煩。經(jīng)實(shí)驗(yàn)，一般雪梨、白蘿卜、白蘿卜組織液實(shí)驗(yàn)效果較好，不僅本身原液無色較透明，而且放置時(shí)間較長而不變色，但是其中梨的成本也比較高。所以從實(shí)驗(yàn)效果和經(jīng)濟(jì)條件來看，選擇廉價(jià)易得的白蘿卜，用其制備的組織樣液如果當(dāng)天用不完，可以儲備起來第二天使用，不變色而且仍然能取得良好的實(shí)驗(yàn)效果。

例如，選擇較便宜的白蘿卜做實(shí)驗(yàn)材料。將白蘿卜切成小塊，放入簡易的手壓式榨汁機(jī)中，通過旋轉(zhuǎn)擠壓制備組織樣液，一般一組只需一塊白蘿卜，一節(jié)課10個(gè)實(shí)驗(yàn)小組只需23個(gè)白蘿卜，而且要求每組學(xué)生自己動手制備組織樣液，提高了學(xué)生的動手能力和合作能力。增加對照組：A組：5%葡萄糖2mL+斐林試劑2mL；B組：白蘿卜組織樣液2mL+斐林試劑2mL；水浴溫度為90℃左右，實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象即可較快出現(xiàn)，節(jié)約時(shí)間，和沸水浴相比，危險(xiǎn)性較小。A、B組對照說明白色蘿卜中富含可溶性還原糖。

二、脂肪的鑒定

核桃、蓖麻、花生、松子種子脂肪含量較高，理論上都可以作為鑒定脂肪的實(shí)驗(yàn)材料。但是核桃果皮堅(jiān)硬、取材不太方便、細(xì)胞中脂滴多，蓖麻種子又比較少見?；ㄉN子常見，而且種皮柔軟、脂滴少一些，干燥的花生種子需要在實(shí)驗(yàn)的前一天晚上開始浸泡，所以比較而言，選擇花生種子比較適宜。松子的脂肪含量要比花生還豐富，實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象更明顯，可供有條件的學(xué)校選擇使用。定性實(shí)驗(yàn)中只要有特異的顏色反應(yīng)，就能確定某種物質(zhì)是否存在。為了增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的對照性和說服力，建議讓學(xué)生從家里帶一些植物油來，使油滴漂浮于水面，再滴加一滴蘇丹Ⅲ染液，馬上就可清晰地看到被染成橘黃色的油滴。

例如，在選擇花生作為實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，最關(guān)鍵的是徒手切片這一步。建議在實(shí)驗(yàn)前對學(xué)生進(jìn)行詳細(xì)指導(dǎo)：切片時(shí)應(yīng)臂部用力，而不是腕部用力。3個(gè)手指捏住花生種子時(shí)要注意食指低于種子，拇指低于食指，然后水平拉片，這是保證不傷手指的關(guān)鍵。切下的材料愈薄愈好，拉片時(shí)刀片與種子切面最好有一點(diǎn)角度，這樣在切下的材料最薄的一側(cè)就只有一兩層細(xì)胞了，觀察這個(gè)部位的材料細(xì)胞中橘黃色脂滴非常明顯。

三、蛋白質(zhì)的鑒定

豆?jié){、牛奶、雞蛋清等都是常用的材料，但是豆?jié){、牛奶都有嚴(yán)重的白色渾濁，影響后面實(shí)驗(yàn)顏色的觀察。雞蛋清無色、清澈透明，蛋白質(zhì)含量也比較高，實(shí)驗(yàn)顏色反應(yīng)顯著，但是如果用雞蛋清，必須按要求稀釋，否則影響實(shí)驗(yàn)效果，而且實(shí)驗(yàn)后易粘住試管壁不易洗刷。

建議將實(shí)驗(yàn)材料改為熟雞蛋清（蛋白質(zhì)變性后雖然空間結(jié)構(gòu)被破壞了，但是肽鏈之間的肽鍵依然存在，使學(xué)生進(jìn)一步理解雙縮脲試劑是與肽鍵發(fā)生反應(yīng)），為了使反應(yīng)充分，可對熟雞蛋清進(jìn)行研磨，課前將雞蛋煮熟，剝?nèi)〕龅鞍?，磨成小顆粒。向試管內(nèi)加入少量的雞蛋白顆粒。加入雙縮脲試劑A液1mL，震蕩片刻。再滴加雙縮脲試劑B液5滴，震蕩。靜置2min后，可觀察到溶液變?yōu)樽仙Ｓ秒u蛋白做檢測實(shí)驗(yàn)，既消除了蛋白質(zhì)變性后不能與雙縮脲試劑生成紫色的誤解，又避免了蛋清稀釋、反應(yīng)后試管難以清洗的麻煩。實(shí)驗(yàn)操作方便，材料準(zhǔn)備簡單。調(diào)動了學(xué)生的積極性，提高了實(shí)驗(yàn)效率，也降低了實(shí)驗(yàn)的難度。

通過學(xué)生實(shí)驗(yàn)結(jié)果和操作過程表明，改進(jìn)后的實(shí)驗(yàn)效果從總體來講是優(yōu)于原實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的，減少了實(shí)驗(yàn)器材的使用，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間，使實(shí)驗(yàn)操作更加簡便易行，體現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)的科學(xué)性與實(shí)用性。改進(jìn)后由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間充足，還可以讓學(xué)生自己探究生活中感興趣想探究的材料。

第3篇

關(guān)鍵詞 服務(wù) 教學(xué)管理 優(yōu)質(zhì)服務(wù)意識

中圖分類號：G717 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

處于新時(shí)代的職業(yè)院校，什么樣的學(xué)生能適應(yīng)現(xiàn)在的社會，可以畢業(yè)即被用人單位使用呢？有些人會質(zhì)疑：現(xiàn)在的大學(xué)以理論知識為基礎(chǔ)，故大學(xué)生剛畢業(yè)確實(shí)比較難適應(yīng)社會，但是職業(yè)院校學(xué)生在校學(xué)量的專業(yè)知識，并進(jìn)行很長時(shí)間的專業(yè)實(shí)訓(xùn)，甚至已經(jīng)接觸過所聘單位的工作崗位，為什么還會出現(xiàn)被單位拒之門外的現(xiàn)象。當(dāng)然原因是多方面的，今天就來談?wù)勔粋€(gè)在職業(yè)院校忽視的專業(yè)教育――服務(wù)意識培養(yǎng)。服務(wù)意識是職業(yè)院校學(xué)生從事服務(wù)行業(yè)最基本的行業(yè)需求，也是職業(yè)院校學(xué)生適應(yīng)行業(yè)需要的最基本的能力和素質(zhì)。因此，服務(wù)意識的培養(yǎng)應(yīng)是成為職業(yè)院校專業(yè)教育最根本的任務(wù)之一。

1現(xiàn)狀分析

（1）學(xué)生勞動觀念較差。由于受家庭和社會大環(huán)境的影響，尤其是90后獨(dú)生子女中普遍存在著勞動觀念不強(qiáng)、勞動習(xí)慣不好、環(huán)境與生存意識淡薄、自理能力弱等現(xiàn)象，更不用說有為別人服務(wù)的習(xí)慣了。這正是學(xué)生綜合素質(zhì)不盡人意的根源，其結(jié)果必將導(dǎo)致責(zé)任感的缺失，在價(jià)值取向上，往往是只圖索取，不思奉獻(xiàn)。

（2）學(xué)校教育的偏差。職業(yè)院校教育中長期存在著重書本理論知識的傳授和專業(yè)技能訓(xùn)練，而忽視對學(xué)生進(jìn)行職業(yè)道德教育、思想政治教育、心理及勞動態(tài)度等因素的培養(yǎng)，不注意在日常行為中培養(yǎng)學(xué)生良好的勞動習(xí)慣。

（3）社會、家庭教育的誤差。長期以來，由于幾千年的“學(xué)而優(yōu)則仕”傳統(tǒng)觀念的影響，從事服務(wù)工作的人被看成是下三流、人下人，至今社會上還有輕視服務(wù)行業(yè)的現(xiàn)象。為使孩子將來能成為人上人，許多家長讓孩子全身心地學(xué)習(xí)，只要學(xué)習(xí)好就一好百好。自己寧肯包攬所有家務(wù)，也不愿給孩子一點(diǎn)勞動的空間，甚至對孩子在學(xué)校的積極、主動的勞動表現(xiàn)極為不滿。久而久之，養(yǎng)成了孩子懶惰和依賴心理，不懂得感恩孝敬父母，不懂得尊重他人的勞動成果，從而影響了良好道德品質(zhì)的形成。

現(xiàn)在開辦的職業(yè)院校大部分培養(yǎng)的是藍(lán)領(lǐng)階層，而藍(lán)領(lǐng)多數(shù)從事的是服務(wù)性或者與服務(wù)有關(guān)的工作，比方說學(xué)汽車維修、電子商務(wù)、旅游、房地產(chǎn)等等。這些工作，職業(yè)院校學(xué)生在畢業(yè)前，都基本接觸過工作崗位，學(xué)校也進(jìn)行了長期、系統(tǒng)的崗位培訓(xùn)，學(xué)生的操作能力可以說是毫無問題，再經(jīng)過公司、單位的具體實(shí)訓(xùn)，應(yīng)該可以成為一個(gè)合格的員工。而事實(shí)上，很多單位已經(jīng)存在大量的員工，他們在招聘的時(shí)候希望在應(yīng)聘者中找到更好的、更能適應(yīng)工作的員工。這就要求職業(yè)院校更注重學(xué)生服務(wù)意識方面的培養(yǎng)。

2職業(yè)院校加強(qiáng)學(xué)生服務(wù)意識的培養(yǎng)是現(xiàn)代職業(yè)教育中迫切需要彌補(bǔ)的內(nèi)容

高職（即高等職業(yè)教育）是高等教育的重要組成部分，是以培養(yǎng)具有一定理論知識和較強(qiáng)實(shí)踐能力，面向基層、面向生產(chǎn)、面向服務(wù)和管理第一線職業(yè)崗位的實(shí)用型、技能型專門人才為目的職業(yè)技術(shù)教育，是職業(yè)技術(shù)教育的高等階段。

高職具有的特征：

（1）學(xué)校在對學(xué)生實(shí)施德育教育的同時(shí)，加強(qiáng)職業(yè)道德教育，充分重視職業(yè)道德的培養(yǎng)。

（2）使學(xué)生具備必要理論知識和科學(xué)文化基礎(chǔ)，熟練掌握主干技術(shù)，側(cè)重實(shí)際應(yīng)用。

（3）側(cè)重相關(guān)知識的綜合運(yùn)用。

（4）培養(yǎng)學(xué)生的表達(dá)能力、與人溝通、合作共事的能力。

（5）重視實(shí)務(wù)知識的學(xué)習(xí)，強(qiáng)化職業(yè)技能的訓(xùn)練

換而言之，現(xiàn)在的職業(yè)學(xué)校并沒有把服務(wù)意識的培養(yǎng)作為教育教學(xué)的教學(xué)內(nèi)容之一，把培養(yǎng)服務(wù)意識扔給了社會，扔給了企業(yè)、單位。而社會競爭本身已經(jīng)存在，這樣不具備服務(wù)意識的學(xué)生踏入社會，自然會被社會拒絕，學(xué)生需要通過多年的工作來培養(yǎng)這種意識，彌補(bǔ)差距。因此在職業(yè)學(xué)校就加強(qiáng)培養(yǎng)學(xué)生的服務(wù)意識，顯得非常有必要。

西方酒店認(rèn)為，服務(wù)就是 SERVICE（本意亦是服務(wù)），其每個(gè)字母都有著豐富的含義：

S-Smile （微笑）：其含義是服務(wù)員應(yīng)該對每一位賓客提供微笑服務(wù)。

E-Excellent （出色）：其含義是服務(wù)員應(yīng)將每一個(gè)服務(wù)程序，每一個(gè)微小服務(wù)工作都做得很出色。

R-Ready （準(zhǔn)備好）：其含義是服務(wù)員應(yīng)該隨時(shí)準(zhǔn)備好為賓客服務(wù)。

V-Viewing （看待）：其含義是服務(wù)員應(yīng)該將每一位賓客看作是需要提供優(yōu)質(zhì)服務(wù)的貴賓。

I-Inviting （邀請）：其含義是服務(wù)員在每一次接待服務(wù)結(jié)束時(shí)，都應(yīng)該顯示出誠意和敬意，主動邀請賓客再次光臨。

C-Creating （創(chuàng)造）：其含義是每一位服務(wù)員應(yīng)該想方設(shè)法精心創(chuàng)造出使賓客能享受其熱情服務(wù)的氛圍。

E-Eye （眼光）：其含義是每一位服務(wù)員應(yīng)該始終以熱情友好的眼光關(guān)注賓客，適應(yīng)賓客心理，預(yù)測賓客要求，及時(shí)提供有效的服務(wù)，使賓客時(shí)刻感受到服務(wù)員在關(guān)心自己。

服務(wù)意識，是對酒店服務(wù)員的職責(zé)、義務(wù)、規(guī)范、標(biāo)準(zhǔn)、要求的認(rèn)識，要求服務(wù)員時(shí)刻保持顧客在我心中的真誠感。而作為在汽車行業(yè)中的服務(wù)員是校企合作商務(wù)方向定向班學(xué)生未來的崗位，服務(wù)意識是同等重要的。

對于單位，員工經(jīng)過培訓(xùn)，成為熟練工并不是一件難事，甚至于沒有經(jīng)過專業(yè)學(xué)校的學(xué)習(xí)，也可以成為一名熟練工，也可以適應(yīng)工作崗位，就像麥當(dāng)勞、肯德基，他們的員工都可以是臨時(shí)招聘的，第二天就可以上崗，但是要做好很難。服務(wù)是一項(xiàng)有著很大彈性空間、感性的工作。它無法用一個(gè)具體的標(biāo)準(zhǔn)去界定和衡量。在實(shí)際工作中，它會因時(shí)、因地、因人、因事而異?？梢哉f每個(gè)人都對“服務(wù)”有著自己的理解和認(rèn)識。但無論怎樣，有一點(diǎn)是很明確的，那就是你的意識提高了，你的服務(wù)才能做好?，F(xiàn)在的企業(yè)、單位缺乏的就是這樣的人才。

而我們職業(yè)院校在學(xué)校就加強(qiáng)服務(wù)意識的培養(yǎng)，那么我們的校企合作商務(wù)方向定向班的學(xué)生在就業(yè)時(shí)就更具有競爭力，更能適應(yīng)崗位職能。缺乏服務(wù)意識已經(jīng)影響到學(xué)生的就業(yè)、單位的用人，成為了亟待解決的社會問題。隨著社會競爭的日益加劇，增強(qiáng)專業(yè)服務(wù)意識的教育是職業(yè)院校生存和發(fā)展的需要，培養(yǎng)校企合作商務(wù)方向定向班學(xué)生的服務(wù)意識是現(xiàn)代汽車行業(yè)職業(yè)教育中的迫切需要彌補(bǔ)的內(nèi)容，是學(xué)生畢業(yè)和適應(yīng)社會的缺口環(huán)節(jié)。職業(yè)院校應(yīng)思考如何使學(xué)生更具競爭力，如何培養(yǎng)單位急需的優(yōu)質(zhì)的藍(lán)領(lǐng)人才。

3在教學(xué)管理中如何進(jìn)行服務(wù)意識教育

3.1進(jìn)行專業(yè)思想教育，樹立正確的服務(wù)觀念

很多學(xué)生是為了掙錢或單純地找到一份職業(yè)才選擇職業(yè)院校，這種動機(jī)危害很大，要是缺乏職業(yè)道德、敬業(yè)精神，只為謀財(cái)而急功近利，因此，服務(wù)意識的培養(yǎng)首先要從養(yǎng)成教育入手，通過專業(yè)思想教育、敬業(yè)愛崗教育，幫助學(xué)生樹立正確的服務(wù)觀念，強(qiáng)化服務(wù)從業(yè)人員的社會責(zé)任感。在教學(xué)中我們常常給學(xué)生灌輸這樣一種理念；“顧客總是對的”“顧客是上帝”“顧客第一”，要求學(xué)生具有寬容、忍耐、服從、敬業(yè)的品格和意志力。學(xué)會服從不是知識、學(xué)識的多少能夠決定的，而是一個(gè)人思想感情、情操、品質(zhì)和精神境界所決定的。學(xué)生在心理理解、接受了這種思想，進(jìn)入這種境界，他在對待顧客的態(tài)度上便會真正貫徹“顧客永遠(yuǎn)都是對的”的服務(wù)觀念，從而無論在任何時(shí)間和場合，對待任何一位顧客，都會笑得更甜、更美、更自然。同時(shí)，百分之百的規(guī)范服務(wù)并不能換取百分之百的客人的百分之百的滿意，這是因?yàn)榉?wù)需求的隨意性很大，盡管服務(wù)員已經(jīng)盡心盡責(zé)，但客人會因其自尊、情緒、個(gè)人癖好、意外情況、及時(shí)需求等原因，提出服務(wù)規(guī)范以外的各種需求。所以我們要教育校企合作商務(wù)方向定向班學(xué)生樹立以人為本的服務(wù)理念，追求盡善盡美的服務(wù)效果，從給顧各創(chuàng)造驚喜中獲取自己的服務(wù)人生，在客人的驚喜中找到富有的人生。

3.2通過學(xué)科理論的滲透，培養(yǎng)服務(wù)意識

在校企合作商務(wù)方向定向班學(xué)生的教育管理中，要充分發(fā)揮學(xué)科滲透的作用，多門學(xué)科的教育要形成合力，在德育教育的時(shí)候我們向?qū)W生傳輸 “我為人人，人人為我”的理念，在日常生活和學(xué)習(xí)中提倡服務(wù)意識更容易被學(xué)生所接受，而這種服務(wù)意識與學(xué)生今后的工作息息相關(guān)，他們樂于培養(yǎng)。適時(shí)培養(yǎng)學(xué)生的服務(wù)意識。如在《服務(wù)禮儀》課教學(xué)中，通過禮儀禮貌等的教育，使學(xué)生明白良好的禮貌禮儀是優(yōu)質(zhì)服務(wù)的重要組成部分，是打開人際溝通的鑰匙，是提升個(gè)人和企業(yè)形象的法寶。讓學(xué)生懂得在對顧各服務(wù)中怎樣才能更熱情、到位，更富有人情味，給人以美好舒適的享受；在《服務(wù)顧問》和《汽車銷售》課程教學(xué)中通過創(chuàng)造“現(xiàn)實(shí)情境”“模擬情境”“交流情境”讓學(xué)生體驗(yàn)做為一名服務(wù)顧問或銷售顧問應(yīng)掌握的規(guī)范化程序。通過這樣的一些活動，全方位提高學(xué)生的服務(wù)意識。服務(wù)意識的培養(yǎng)可以讓學(xué)生更好地了解本專業(yè)知識，提高專業(yè)技能，為今后的工作奠定基礎(chǔ)。在專業(yè)課培訓(xùn)的同時(shí)加上對服務(wù)意識的教育，可以讓學(xué)生掌握整個(gè)銷售過程中的服務(wù)環(huán)節(jié)，在注重經(jīng)濟(jì)利益的同時(shí)，注重社會效應(yīng)等，讓學(xué)生明白優(yōu)質(zhì)的服務(wù)與豐厚的經(jīng)濟(jì)利益是相輔相成的。

3.3優(yōu)化育人環(huán)境，隨時(shí)培訓(xùn)

在教育學(xué)生的同時(shí)教師的服務(wù)意識又怎樣呢？只要求學(xué)生有服務(wù)意識而教師卻沒有，這樣的教育是不平等的，也決不會有好的結(jié)果。所以，教師的服務(wù)意識教育同樣需要加強(qiáng)。在對校企合作商務(wù)方向定向班學(xué)生的日常管理教育中，學(xué)生的服務(wù)意識的培養(yǎng)與教育不光取決于班主任或?qū)I(yè)課教師及有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)的教育水平如何，也取決于學(xué)校全體教育工作者對學(xué)生進(jìn)教育時(shí)的服務(wù)意識如何。所以，學(xué)校要營造出“教書育人”“服務(wù)育人”“管理育人”“環(huán)境育人”“活動育人”的整體氛圍，以出色的服務(wù)為學(xué)生創(chuàng)造良好的學(xué)習(xí)環(huán)境。

同時(shí)服務(wù)意識的培訓(xùn)應(yīng)該貫徹在學(xué)生學(xué)習(xí)生活的方方面面。筆者還是以校企合作商務(wù)方向定向班學(xué)生為例。在每次課前，每一個(gè)值日生都要做到提前檢查擴(kuò)音設(shè)備，教師進(jìn)入教室前，要求學(xué)生將窗簾系好，如果教師利用多媒體，學(xué)生自覺拉上窗簾；隨時(shí)保持教室的整潔，每個(gè)值日生都參與到教室中花草的養(yǎng)護(hù)中；教師上課前，學(xué)生到教師辦公室詢問是否有教具和設(shè)備需要搬運(yùn)等等。這樣經(jīng)過一段時(shí)間后學(xué)生在平時(shí)逐步養(yǎng)成隨時(shí)注意自己的言行，方便他人，為他人服務(wù)的習(xí)慣。利用細(xì)節(jié)全面地培養(yǎng)學(xué)生的服務(wù)意識。

3.4培養(yǎng)學(xué)生良好的心理素質(zhì)

校企合作商務(wù)方向定向班從業(yè)人員要具有良好的心理素質(zhì)，隨時(shí)準(zhǔn)備承受顧客的埋怨和打擊。由于顧客對汽車專業(yè)知識的認(rèn)知有限，加之汽車是一個(gè)家庭比較大的消費(fèi)品的支出，一旦出現(xiàn)問題，顧客的報(bào)怨和情緒失控是經(jīng)常發(fā)生的，這就要求校企合作商務(wù)方向定向班學(xué)生在各種環(huán)境中都能保持一種積極的、良好的心理狀態(tài)，要學(xué)會釋放心理壓力，不僅能控制自我情緒不受外界環(huán)境影響，還能做到換位思考，化解矛盾，讓顧客“轉(zhuǎn)怒為喜”，真正做到為顧客提供超值服務(wù)。

總的來講，培養(yǎng)一個(gè)可以具備操作基礎(chǔ)技能，一個(gè)能得到顧客認(rèn)可的員工。學(xué)校擔(dān)負(fù)著學(xué)生的全面教育，包括對學(xué)生優(yōu)質(zhì)服務(wù)意識的培養(yǎng)。把知識傳授與道德熏陶結(jié)合起來，努力提高學(xué)生的科學(xué)和人文素質(zhì)，促使學(xué)生追求自身完善，培養(yǎng)學(xué)生不服輸?shù)木窈筒粩噙M(jìn)取的意識；其次，還應(yīng)關(guān)心學(xué)生社團(tuán)組織建設(shè)，在鼓勵(lì)學(xué)生展示個(gè)性、發(fā)掘潛能的；第三，應(yīng)加強(qiáng)職業(yè)院校學(xué)生實(shí)習(xí)、實(shí)訓(xùn)階段的愛崗敬業(yè)的職業(yè)道德教育工作，用規(guī)范的企業(yè)規(guī)章制度、職業(yè)道德規(guī)范學(xué)生的行為，真正把學(xué)生培養(yǎng)成為受企業(yè)歡迎、思想政治素質(zhì)好的汽車行業(yè)高技能專門人才，教會學(xué)生如何為顧客提供優(yōu)質(zhì)服務(wù)。

參考文獻(xiàn)